Análise eletroforética de isoenzimas para detecção de contaminação cruzada entre linhagem celulares

Abstract

A importância das linhagens celulares em diversas áreas da pesquisa torna fundamental um monitoramento contínuo quanto à possível contaminação cruzada interespécies. A análise eletroforética de isoenzimas utilizada para identificação da espécie de origem das linhagens celulares pode também determinar uma possível contaminação interespécies. O objetivo deste trabalho é verificar a ensibilidade do método no controle de qualidade das linhagens utilizadas rotineiramente em pesquisa e diagnóstico por meio de uma mistura experimental de pares de linhagens celulares (RK-13/Vero, MDBK/Vero e PK-15/ Vero), utilizando as seguintes isoenzimas: lactato desidrogenase, glicose-6-fosfato desidrogenase, malato desidrogenase e esterase. A detecção da contaminação cruzada entre linhagens celulares por meio da análise eletroforética de isoenzimas foi efetiva quando utilizada as isoenzimas, lactato desidrogenase e malato desidrogenase, com uma sensibilidade de 5 e 10% de contaminação, respectivamente. A detecção da glicose-6-fosfato desidrogenase e esterase não foi apropriada em algumas misturas, devido ou à proximidade de migração das bandas ou à sua ausência, mas quando possível, a sensibilidade foi de 5%. O uso de, pelo menos, duas ou mais isoenzimas se faz necessário para obtenção de resultados mais satisfatórios e confiáveis. Um monitoramento de linhagens com fim de controle de qualidade para fornecimento de resultados confiáveis e compatíveis entre laboratórios pode se utilizar dessa técnica que demonstrou um nível de detecção de contaminação entre 5 a 10% da população celular.